What You Will Learn!
- Histórico
- Conceito
- Inserto
- Vetor
- Células hospedeiras
- Enzimas de restrição
- DNA ligase
- DNA recombinante
- Expressão heteróloga
Description
A tecnologia do DNA recombinante se refere a um conjunto de técnicas que permite aos cientistas identificarem, isolarem, multiplicarem e expressarem genes de quaisquer organismos!
Com ela é possível realizar:
Estudo dos genes de um organismo = Estudos genômicos;
Estudo da regulação de um gene ou conjunto de genes;
Desenvolvimento de Vacinas e de Vacinas de DNA;
Desenvolvimento de Terapias gênicas;
Produção de transgênicos;
Produção de produtos biotecnológicos/medicamentos/enzimas;
Diagnóstico médico;
Tecnologia forense (crimes, paternidade, controle de qualidade);
Estudo do produto final do gene: RNA/Proteína.
Nesse contexto, serão apresentadas as etapas da clonagem molecular:
Isolamento de fragmentos de DNA (gene de interesse) a serem clonados.
Inserção de DNA isolado em um vetor adequado para formar DNA recombinante.
Introdução de DNA recombinante em um organismo adequado conhecido como hospedeiro.
Seleção de células hospedeiras transformadas e identificação do clone contendo o gene de interesse.
Multiplicação / Expressão do Gene introduzido no hospedeiro.
Isolamento de múltiplas cópias do gene / proteína expressa pelo gene.
Purificação da cópia / proteína do gene isolado
Você aprenderá todo passo a passo desde o planejamento e preparação do DNA recombinante à posterior expressão heteróloga da proteína em um sistema de expressão apropriado, para que então possa purificá-la. Essa visão geral de todo o espectro de clonagem molecular possibilita um planejamento coerente de acordo com os objetivos do experimento.
Who Should Attend!
- Pesquisadores iniciantes na pesquisa utilizando tecnologia do DNA recombinante
